固定相與流動相均為液體（互不相溶）；

1.基本原理：組分在固定相和流動相上的分配

2.流動相：對于親水性固定液，采用疏水性流動相，即流動相的極性小于固定液的極性（正相 normal phase），反之，流動相的極性大于固定液的極性（反相 reverse phase）。正相與反相的出峰順序相反；

3.固定相：早期涂漬固定液，固定液流失，較少采用；

化學(xué)鍵合固定相：將各種不同基團(tuán)通過化學(xué)反應(yīng)鍵合到硅膠（擔(dān)體）表面的游離羥基上。C-18柱（反相柱）。

 

    分配色譜法是液相色譜法中應(yīng)用zui廣泛的一種。它類似于溶劑萃取，溶質(zhì)分子在兩種不相混溶的液相即固定相和流動相之間按照它們的相對溶解度進(jìn)行分配。一般將分配色譜法分為液液色譜和鍵合相色譜兩類。

    液液色譜的固定相是通過物理吸附的方法將液相固定相涂于載體表面。在液液色譜中，為了盡量減少固定相的流失，選擇的流動相應(yīng)與固定相的極性差別很大。由此人們將固定相為極性，流動相為非極性的液相色譜稱為正相液相色譜；相反的稱為反相液相色譜。

    鍵合相色譜的固定相是通過化學(xué)反應(yīng)將有機(jī)分子鍵合在載體或硅膠表面上。目前，鍵合固定相一般采用硅膠為基體，利用硅膠表面的硅醇基于有機(jī)分子之間成建，即可得到各種性能的固定相。一般來說，鍵合的有機(jī)基團(tuán)主要有兩類：疏水基團(tuán)、極性基團(tuán)。疏水基團(tuán)有不同鏈長的烷烴（C8和C18）和 苯基等。極性基團(tuán)有丙胺基、氰乙基、二醇、氨基等。與液液色譜類似，鍵合相色譜也分為正相鍵合相色譜和反相鍵合相色譜。